服務簡介:

　　TA克隆技術(TA Cloning)利用Taq聚合酶具有末端轉移酶(TdT)活性，但卻不具有3'-5'端外切酶校準活性的特點，可在PCR產物的3'端加上一個非模板依賴堿基“A”。 pMD18/19-T是一種高效克隆PCR產物的專用載體，它是由pUC18載體在Xba I和Sal I識別位點間插入一個EcoR V位點，然后用EcoR V進行酶切使質粒線性化，并在它的3'端添加“T”構建而成。因其3'端帶有一個突出的“T”尾，能高效地與帶“A”尾的PCR產物連接，極大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR產物最簡便、快捷的方法。

　　服務流程:

　　訂單確認——鑒定樣品濃度、片段長度——加A尾——PCR產物和Pmd18/19-T載體連接——轉化并篩選重組子——重組子測序——測序結果分析

　　訂購信息：

　　客戶提供：

　　客戶提供PCR產物及相關克隆片段的相關信息，包括名稱，大小、樣品是否帶有”A”尾以及PCR產物是否已純化。

　　注：

　　已純化的PCR產物請確保使用的溶劑為滅菌的雙蒸水。

　　請提供濃度≥20ng/μl,總體積≥50μl的PCR產物，所需DNA的總量會隨片段大小的不同而有所變化。

　　請務必在訂單上注明PCR所用引物序列，以便用于克隆結果的核對分析。

　　當克隆結果中包含合作伙伴提供的單項部分引物序列，我們即視實驗成功，將收取全額的實驗費用。

　　若序列中包含高GC、Poly等特殊或復雜結構導致測序和中斷，我們即視實驗成功，將收取全額的實驗費用。

　　最終交付：

　　1、1-2 μg 含目的片段的經測序的陽性克隆質粒(如需要);

　　2、項目文件：測序原始圖譜和序列、去載體后的序列。